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液相色譜法概述
液相色譜法(HPLC)是上個世紀七十年代迅速發展起來的一項、的分析分離技術,是現代分離測試的重要手段。色譜法的分離原理是:溶于流動相(mobile phase)中的各組分經過固定相時,由于與固定相(station phase)發生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強弱不同,在固定相中滯
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液相色譜法概述
液相色譜法(HPLC)是上個世紀七十年代迅速發展起來的一項、的分析分離技術,是現代分離測試的重要手段。色譜法的分離原理是:溶于流動相(mobile phase)中的各組分經過固定相時,由于與固定相(station phase)發生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強弱不同,在固定相中滯留時間不同,從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。
液相色譜的基本原理
液相色譜基本原理是分離度(也叫分辨率)正比于
四分之理論塔板數n的平方根乘以
選擇因子a比上a-1再乘以
分離因子k+1比上k
我認為分離度和這些變量是正比關系而不是準確的等于,如果非要說是等于的關系,再加上一個常數可能會更合理。
n和柱長(正比)、粒徑(反比)、固定項填料(全多孔硅膠型,表面多孔/核殼型)有關
a和流動相種類(反向色譜:和)、pH(2到9)、柱溫有關
分離因子/保留因子(平衡狀態下,固定相中含量與流動相中的比值)和流動相種類、流動相比例、柱溫、固定相填料有關
液相色譜常見問題
在日常工作中,遇見液相色譜儀哪些異常情況?又是如何解決的?
峰的問題:峰前沿,峰重疊,峰拖尾,鬼峰,基線漂移。
壓力問題:超壓,低壓,壓力波動。
硬件問題:日常損耗,零件損壞。
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液相色譜儀常見故障解決方案
出現壓力波動大,流量不穩定該怎么辦?
造成這種情況的原因是系統中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物,使得兩者不能密封。處理工作中注意觀察流動相的量,保證不銹鋼濾器沉入儲液器瓶底,避免吸入空氣,流動相要充分脫氣。如為單向閥和閥座之間夾有異物,拆下單向閥,放入盛有的燒杯用超聲波清洗。
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