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液相色譜儀
儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中作相對運動時,經過反復多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成
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液相色譜儀
儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中作相對運動時,經過反復多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來液相色譜儀主要有進樣系統、輸液系統、分離系統、檢測系統和數據處理系統
液相色譜法概述
液相色譜法(HPLC)是上個世紀七十年代迅速發展起來的一項、的分析分離技術,是現代分離測試的重要手段。色譜法的分離原理是:溶于流動相(mobile phase)中的各組分經過固定相時,由于與固定相(station phase)發生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強弱不同,在固定相中滯留時間不同,從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。
液相色譜
HPLC對流動相的一般要求
流動相就比如人體的血液,其質量直接影響到整個系統的正常運行與否。
應該使用HPLC級的溶劑,不能互相混溶的溶劑不可以直接切換!一般在水相和與其不混溶的溶劑切換時,使用異作為過渡溶劑。
注意溶劑的截止波長。截止波長是指該溶劑可以在紫外檢測器中使用的低波長,該波長后,溶劑會有很強的紫外吸收,從而影響極限的穩定性、干擾對所分析物質的檢測。
HPLC所使用的水必須是新鮮的和經過0.45μm濾膜過濾過的。建議每天更換新鮮的水。長期不用時,必須把使用水的管路用置換,防止長霉。
儀器使用完后要采用適當的溶劑沖洗等方法維護色譜柱和系統。如果使用了緩沖鹽一定先將鹽要沖洗干凈。
儀器長期不用時,不建議使用純封存。因為有生成聚合物的趨勢。建議使用、/水或/水封存。
當有流路堵塞時,可以嘗試將之反接后沖洗。污染的溶劑或溶劑瓶里的藻類生長將會縮短溶劑過濾器的使用壽命,并且影響泵和系統的的性能。這在水溶劑或磷酸鹽緩沖液(pH 4 至7) 中尤其如此。
液相色譜的基本原理
液相色譜基本原理是分離度(也叫分辨率)正比于
四分之理論塔板數n的平方根乘以
選擇因子a比上a-1再乘以
分離因子k+1比上k
我認為分離度和這些變量是正比關系而不是準確的等于,如果非要說是等于的關系,再加上一個常數可能會更合理。
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