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液相色譜
二元高壓、四元低壓:
二元高壓系統(tǒng):兩種試液經(jīng)過高壓泵流入混合器,在其中充分進(jìn)行空間混合,高壓輸入液體在混合器中混合會(huì)更加充分
四元低壓系統(tǒng):可以混合四種不同試劑配比,按照時(shí)間來吸取試劑,試劑在管道中會(huì)產(chǎn)生交界處的混合,同時(shí)會(huì)產(chǎn)品氣泡,精度會(huì)一定偏差
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二元高壓系統(tǒng):兩種試液經(jīng)過高壓泵流入混合器,在其中充分進(jìn)行空間混合,高壓輸入液體在混合器中混合會(huì)更加充分
四元低壓系統(tǒng):可以混合四種不同試劑配比,按照時(shí)間來吸取試劑,試劑在管道中會(huì)產(chǎn)生交界處的混合,同時(shí)會(huì)產(chǎn)品氣泡,精度會(huì)一定偏差
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液相色譜法概述
液相色譜法(HPLC)是上個(gè)世紀(jì)七十年代迅速發(fā)展起來的一項(xiàng)、的分析分離技術(shù),是現(xiàn)代分離測(cè)試的重要手段。色譜法的分離原理是:溶于流動(dòng)相(mobile phase)中的各組分經(jīng)過固定相時(shí),由于與固定相(station phase)發(fā)生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強(qiáng)弱不同,在固定相中滯留時(shí)間不同,從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。
液相色譜根據(jù)分離機(jī)理的不同可分為:
液固吸附色譜
液液分配色譜
離子交換色譜
離子對(duì)色譜法
分子排阻色譜(或凝膠滲透色譜)
(一)液-固吸附色譜
流動(dòng)相為液體,固定相為固體吸附劑,根據(jù)物質(zhì)吸附作用的不同來分離物質(zhì)。
(二)液-液分配色譜
流動(dòng)相和固定相都是液體的色譜法即為液-液色譜,是利用樣品組分在兩種不相溶的液相間的分配來進(jìn)行分離。一種液相為流動(dòng)相,另一種是涂于載體上的固定相。
流動(dòng)相極性小于固定相極性的液-液色譜法稱為正相分配色譜法。
流動(dòng)相極性大于固定相極性的液-液色譜法稱為反相分配色譜法。
(三)離子交換色譜
(四)離子對(duì)色譜法
(五)分子排阻色譜法
液相色譜儀常見故障解決方案
液相色譜儀峰面積重復(fù)性不好怎么回事?
主要原因可能有進(jìn)樣閥漏液、加樣針不到位或液量不足。針對(duì)種情況,處理時(shí)應(yīng)對(duì)更換進(jìn)樣閥墊圈;對(duì)于第二種情況保證加樣針插到底,注射樣品溶液后須、平穩(wěn)地從LOAD狀態(tài)轉(zhuǎn)換到INJECT狀態(tài),以保證進(jìn)樣量的準(zhǔn)確。日常工作中,液相色譜儀的保養(yǎng)非常重要,如要注意不要讓空氣進(jìn)入輸液系統(tǒng)和高壓泵中,儲(chǔ)液器內(nèi)的溶液如長(zhǎng)時(shí)間未用應(yīng)清洗儲(chǔ)液器并更換溶液,每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖洗干凈,防止無機(jī)鹽析出或沉積;樣品的前處理也很重要,任何樣品都要盡可能地去除雜質(zhì),完全溶解,盡量減少對(duì)色譜柱的污染,以延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命,同時(shí)避免注射過濃的樣品溶液,以免殘留液在進(jìn)樣閥內(nèi)析出固體引起堵塞;色譜柱作好標(biāo)記,用于不同分析目的的色譜柱不要混用等。
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