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液相色譜法概述
HPLC是在經典的液相色譜法基礎上發展起來的，其以液體作為流動相，并采用顆粒極細的固定相的柱色譜分離技術。其分離機制與常規柱色譜相同，但填料更加精細，需高壓泵推動，柱效高，分析速度快。與氣相色譜不同的是液相色譜中流動相亦參與組分的分離過程，其組成、比例和pH值可靈活調節，分離模式多樣。在實際操
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液相色譜法概述
HPLC是在經典的液相色譜法基礎上發展起來的，其以液體作為流動相，并采用顆粒極細的固定相的柱色譜分離技術。其分離機制與常規柱色譜相同，但填料更加精細，需高壓泵推動，柱效高，分析速度快。與氣相色譜不同的是液相色譜中流動相亦參與組分的分離過程，其組成、比例和pH值可靈活調節，分離模式多樣。在實際操作中主要通過改變流動相的組成來調節樣品在色譜柱的保留值和選擇性，從而使不同樣品得到分離。
液相色譜的基本原理
液相色譜基本原理是分離度(也叫分辨率)正比于
四分之理論塔板數n的平方根乘以
選擇因子a比上a-1再乘以
分離因子k+1比上k
我認為分離度和這些變量是正比關系而不是準確的等于，如果非要說是等于的關系，再加上一個常數可能會更合理。
n和柱長(正比)、粒徑(反比)、固定項填料(全多孔硅膠型，表面多孔/核殼型)有關
a和流動相種類(反向色譜：和)、pH(2到9)、柱溫有關
分離因子/保留因子(平衡狀態下，固定相中含量與流動相中的比值)和流動相種類、流動相比例、柱溫、固定相填料有關
液相色譜法可以不做標準曲線嗎？
首先要明確做標準曲線的目的，一般是為了含量測定作為標準品來用。液相色譜的濃度和峰面積成正比，樣品的含量未知，濃度也就未知，峰面積可讀。那么這時需要一個已知含量和已知峰面積的對照品。這個時候做不做標準曲線要看試驗方法，有的方法是外標法，也就是和你樣品濃度一樣的對照品，平行配制兩個，進樣分析。有的方法是內標法，就需要樣品中添加內標物。還有的面積化，那就什么對照都不要進了。方法要看你的質量標準，上面應該有計算方法，上面寫的是什么，就按照什么來做。不是非標準曲線不可的。
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