動物實驗檢測技術(shù)在動物疫病防控中的作用
在國內(nèi)動物疫病檢測中,檢測人員需要預(yù)先在實驗室內(nèi)將動物的產(chǎn)品及動物有關(guān)物品開展檢查、檢測,并根據(jù)實際的檢測結(jié)果,開展動物疫病的防控,并建立科學(xué)完善的防控體系。疫病防控單位需要組建實驗室,并為實驗室配備的檢測儀器,配備的檢測人員,進(jìn)而提高實驗室的檢測能力和檢測水平。
樣品預(yù)處理
在待測樣品中,DNA或RNA通常
動物全自動血液分析
動物實驗檢測技術(shù)在動物疫病防控中的作用
在國內(nèi)動物疫病檢測中,檢測人員需要預(yù)先在實驗室內(nèi)將動物的產(chǎn)品及動物有關(guān)物品開展檢查、檢測,并根據(jù)實際的檢測結(jié)果,開展動物疫病的防控,并建立科學(xué)完善的防控體系。疫病防控單位需要組建實驗室,并為實驗室配備的檢測儀器,配備的檢測人員,進(jìn)而提高實驗室的檢測能力和檢測水平。
樣品預(yù)處理
在待測樣品中,DNA或RNA通常都是被蛋白包裹纏繞,根據(jù)不同的細(xì)胞和組織樣品的應(yīng)用,可選擇合適的預(yù)處理方法將靶核酸暴露:
內(nèi)源性酶滅活:如果探針的檢測是通過酶促法進(jìn)行的,則樣品內(nèi)相應(yīng)的內(nèi)源性酶必須被滅活。如內(nèi)源性的POD可通過含1%H2O2的甲醛溶液處理30min。如果檢測酶為AP,可在底物溶液中加入左旋咪唑,AP檢測的內(nèi)源性背景一般來說比POD檢測的低得多,因為在雜交過程中,樣品中內(nèi)源性AP酶的活性基本都喪失了。
RNase處理:在DNA-DNA雜交實驗中,RNase的處理可去除內(nèi)源性RNA,增加實驗的信噪比。在進(jìn)行mRNA為靶標(biāo)的檢測時,RNase處理的樣品也可作為質(zhì)控對照。通常的處理方式是將DNase-free的RNase溶解于2×SSC(100μg/ml),樣品在溶液中37℃處理60min。

肝纖維化動物模型化學(xué)性損傷法:
雄性Wistar大鼠,體重130g左右,用腹腔內(nèi)注射,次20mg/100g體重,從第二次起12mg/100g體重,每周注射2次,共8周。
評價:第3周,在肝小葉間中間帶出現(xiàn)大片的肝細(xì)胞變性壞死和炎細(xì)胞浸潤,炎細(xì)胞浸潤、壞死細(xì)胞數(shù)和程度超過豬模型。6周后出現(xiàn)纖維束,纖維晚于和少于豬模型。大鼠肝纖維組織中有I型膠原的mRNA增多。

動物模型評價:
1. IDA大鼠早期(Hb≤100g/L)表現(xiàn)為毛發(fā)生長差、脫毛、眼球腫脹突出、蒼白、興奮為主,晚期(Hb≤60g/L)表現(xiàn)為倦怠、活動減少,易為主;
2. 血液學(xué)及生化檢查表現(xiàn)為血紅蛋白及鐵(功能池)、濃度(交換池)、運鐵蛋白及鐵含量(貯存池)均顯著正常對照組。其中以血紅蛋
白和鐵的變化較敏感。
3. 低鐵飼料喂養(yǎng)大鼠5、6周即可出上述表現(xiàn),F(xiàn)344、Wistar大鼠的反應(yīng)性優(yōu)于SD大鼠。
4. 此模型形成期短、穩(wěn)定、可行,是研究IDA的一個可靠動物模型。

(作者: 來源:)