肺缺血再灌注損傷是由于機體組織或在缺血再灌注后導致肺組織迅速損傷。缺血再灌注可能發生在肺,也可能是下肢或腹主動脈等,導致肺泡上皮細胞和肺毛細胞血管內皮細胞受損。
究其原因可能與組織細胞聚集、氧自由基產生和促炎因子釋放等病理生理反應有關。
結扎法制備肺缺血再灌注損傷模型常用,因其操作簡單、成功率高、實用性強,是研究肺缺血再灌注損傷發病機制和防治保護的關鍵。
制備
動物生化指標檢測
肺缺血再灌注損傷是由于機體組織或在缺血再灌注后導致肺組織迅速損傷。缺血再灌注可能發生在肺,也可能是下肢或腹主動脈等,導致肺泡上皮細胞和肺毛細胞血管內皮細胞受損。
究其原因可能與組織細胞聚集、氧自由基產生和促炎因子釋放等病理生理反應有關。
結扎法制備肺缺血再灌注損傷模型常用,因其操作簡單、成功率高、實用性強,是研究肺缺血再灌注損傷發病機制和防治保護的關鍵。
制備肺缺血再灌注模型我們選用適齡的SD大鼠,通過結扎手術進行造模。
神經元原代培養是將胚胎哺乳動物神經系統的部分組織,如大腦皮層、海馬、脊髓等腦組織直接取出,再接種培養的方法。目前國內、外有關神經元培養的方法較多,但在原代培養中神經元的純度和產量方面還存在一些急待解決的問題。由于神經元是一種高度分化的細胞,相對于其它細胞而言,神經元在體外更難以存活和生長。因此,體外培養神經元要求的培養方法和營養條件均較為特殊。
神經細胞的體外培養技術是研究神經源性疾病的發病機制、進程的一個重要工具,能很好的、直觀的反映離體神經元的發育狀況和生理活性,如何建立一個穩定成熟的神經細胞培養體系是神經系統疾病體外實驗研究順利進行的基礎。隨著基礎醫學及臨床醫學研究的逐漸深入,神經細胞的體外培養技術在腦損傷、神經疾病、衰老相關神經疾病方面得到廣泛重視和普及應用。
原位雜交涉及的步驟:玻片的準備和樣品固定,細胞或組織的預滲透處理,靶DNA變性(DNA原位雜交),探針制備,原位雜交過程,雜交后洗滌,探針(顯色)檢測。
玻片的準備和樣品固定
對于染色體涂片,1:1的乙醇/醚處理的載玻片已能符合要求。對于組織切片的原位雜交,為了在實驗過程中不丟失組織樣品,可使用多聚賴氨酸或鉻礬明膠包被的載玻片。
樣品的固定步驟是為了保持樣品的原有形態學。樣品固定是原位雜交中的步驟,從化學反應角度來看,固定劑的使用和選擇對后續雜交的影響不會太大,因為核酸雜交的功能分子基團被安全地包裹在DNA雙螺旋結構中,而交聯劑的使用對RNA基本沒有影響。對于染色體涂片,常使用/固定;石蠟包埋的組織切片用固定。冷凍切片可通過在4%的甲醛溶液中固定30min,或使用Bouin固定劑。
它是伴隨著生物醫學科學,通過漫長的動物實驗過程形成的。但是,實驗動物科學的迅速發展,使得實驗動物的研究價值已經不于生物科學方面,而且廣泛地與許多領域科學實驗研究緊緊地聯系在一起,成為保證現代科學實驗研究的一個的條件。在很多領域的科學研究中,實驗動物充當著非常重要的安全試驗,效果試驗、標準試驗的角色。
(作者: 來源:)