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離子交換層析中,為什么用氯離子洗脫陰離子
陰離子交換柱的填料是正電填料,在低鹽條件下可以通過電荷相互作用吸附樣品中的陰離子和負電荷物質(如DNA).這些帶負電的物質由于其帶電量不同,分子大小不同,因而與正電填料之間的結合力也就不同.用梯度的氯離子(一般用氯化鈉梯度,例如從100mM氯化鈉線性梯度升高到1M氯化鈉
東曹TOYOPEARL 親和層析填料報價
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離子交換層析中,為什么用氯離子洗脫陰離子
陰離子交換柱的填料是正電填料,在低鹽條件下可以通過電荷相互作用吸附樣品中的陰離子和負電荷物質(如DNA).這些帶負電的物質由于其帶電量不同,分子大小不同,因而與正電填料之間的結合力也就不同.用梯度的氯離子(一般用氯化鈉梯度,例如從100mM氯化鈉線性梯度升高到1M氯化鈉)洗脫掛柱樣品時,氯離子會和結合上的物質競爭結合正電填料,伴隨著氯離子濃度的不斷升高,氯離子的競爭作用越來越強,與填料結合的物質會按照親和力從弱到強依次洗脫下來,形成獨立的洗脫峰,從而將這些物質分開.
陽離子交換柱與之正好相反,柱子填料為負電荷,用鈉離子洗脫結合的正電物質.
層析填料的分類
在把微細分散的固體或是附著于固體表面的液體作為固定相,把液體(與上述液體不相混合的)或氣體作為移動相的系統中,使試料混合物中的各成分邊保持向兩相分布的平衡狀態邊移動,利用各成分對固定相親和力不同所引起的移動速度差,將它們彼此分離開的定性與定量分析方法,稱為層析,亦稱色譜法。根據移動相種類的不同,分為液體層析、氣體層析二種。
層析填料交換分離
離子交換層析根據化合物的凈電荷進行分離。帶負電荷或正電荷的官能團共價結合于固相載體基質,分別成為陽離子交換劑和陰離子交換劑。當一個帶電荷的分子加入到帶有相反電荷的交換劑時,它就會被吸附,同時,帶相同電荷的離子和中性分子則被洗脫到層析柱的外水體積里。帶電荷分子的結合是可逆的,通常可用鹽或PH梯度洗脫吸附的分子。 離子交換層析可以有多種應用,包括分離和純化生物分子,分離無機離子,試劑和水的去離子化,鹽轉換以及去除金屬離子、化乙錠和SDS。 化合物的分離策略。如果分子在PH高于其等電點時穩定,可使用陰離子交換樹脂。如果分子在PH其等電點時穩定,則使用陽離子交換樹脂。
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