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液相色譜法
液相色譜法的應用范圍十分廣泛,對樣品的適用性廣,不受分析對象揮發性和熱穩定性的限制,幾乎所有的化合物包括高沸點、極性、離子型化合物和大分子物質均可用液相色譜法分析測定,因而彌補了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機化合物中,可用氣相色譜分析的約占20% ,而80% 則需用液相色譜來分析。HPLC因其
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液相色譜法
液相色譜法的應用范圍十分廣泛,對樣品的適用性廣,不受分析對象揮發性和熱穩定性的限制,幾乎所有的化合物包括高沸點、極性、離子型化合物和大分子物質均可用液相色譜法分析測定,因而彌補了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機化合物中,可用氣相色譜分析的約占20% ,而80% 則需用液相色譜來分析。HPLC因其具有分離效能高、分析速度快、檢測靈敏度好、能分析和分離高沸點且不能氣化的熱不穩定生理活性物質的特點而被廣泛應用于生物化學、及臨床分析,己將該法收載于藥典。
液相色譜
HPLC對流動相的一般要求
流動相就比如人體的血液,其質量直接影響到整個系統的正常運行與否。
應該使用HPLC級的溶劑,不能互相混溶的溶劑不可以直接切換!一般在水相和與其不混溶的溶劑切換時,使用異作為過渡溶劑。
注意溶劑的截止波長。截止波長是指該溶劑可以在紫外檢測器中使用的低波長,該波長后,溶劑會有很強的紫外吸收,從而影響極限的穩定性、干擾對所分析物質的檢測。
HPLC所使用的水必須是新鮮的和經過0.45μm濾膜過濾過的。建議每天更換新鮮的水。長期不用時,必須把使用水的管路用置換,防止長霉。
儀器使用完后要采用適當的溶劑沖洗等方法維護色譜柱和系統。如果使用了緩沖鹽一定先將鹽要沖洗干凈。
儀器長期不用時,不建議使用純封存。因為有生成聚合物的趨勢。建議使用、/水或/水封存。
當有流路堵塞時,可以嘗試將之反接后沖洗。污染的溶劑或溶劑瓶里的藻類生長將會縮短溶劑過濾器的使用壽命,并且影響泵和系統的的性能。這在水溶劑或磷酸鹽緩沖液(pH 4 至7) 中尤其如此。
液相色譜儀常見故障解決方案
自檢時,為什么有時會出現“鎢燈能量低”的錯誤?
一般來說,原因是系統中有擋光物,光路偏離,鎢燈電源系統或鎢燈燈泡已壞。這時首先要檢查光度室是否有擋光物;打開檢測器光源室蓋,檢查燈是否點亮;如果燈不亮,則關機,更換新燈,換時,需注意型號;檢查燈保險絲,看是否松動、氧化、燒斷;如果故障,應立即更換;再開機重新自檢;若仍出現上述故障,則重新安裝軟件后再進行自檢。
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