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企業(yè)視頻展播，請點擊播放視頻作者：北京慧德易科技有限責(zé)任公司液相色譜儀在生物制藥中的應(yīng)用液相色譜儀是近幾十年發(fā)展起來的一種、的分離分析技術(shù)，是現(xiàn)代分離檢測的重要工具。液相色譜儀是以經(jīng)典液相色譜儀為基礎(chǔ)，引入氣相色譜儀的理論和實驗方法，將流動相改為高壓輸送，采用固定相和在線檢測等手段，發(fā)展而成的分離分析技術(shù)，具有高壓、高速、、高靈敏度、高選擇性和應(yīng)用范圍廣等特點，
TOSOH尺寸排阻色譜柱價格

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視頻作者：北京慧德易科技有限責(zé)任公司

液相色譜儀在生物制藥中的應(yīng)用

液相色譜儀是近幾十年發(fā)展起來的一種、的分離分析技術(shù)，是現(xiàn)代分離檢測的重要工具。液相色譜儀是以經(jīng)典液相色譜儀為基礎(chǔ)，引入氣相色譜儀的理論和實驗方法，將流動相改為高壓輸送，采用固定相和在線檢測等手段，發(fā)展而成的分離分析技術(shù)，具有高壓、高速、、高靈敏度、高選擇性和應(yīng)用范圍廣等特點，成為生物制藥領(lǐng)域發(fā)展快、應(yīng)用的現(xiàn)代分析技術(shù)之一。

液相色譜柱外界因素影響

色譜是一種分離分析手段，分離是，因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好，分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁、有機(jī)聚合物微球（包括離子交換樹脂）、多孔碳等，其粒度一般為3,5,7,10μm等，柱效理論值可達(dá)5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效；對于同系物分析，只要500即可；對于較難分離物質(zhì)對則可采用高達(dá)2萬的柱子，因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要。

柱效受柱內(nèi)外因素影響，為使色譜柱達(dá)到佳效率，除柱外死體積要小外，還要有合理的柱結(jié)構(gòu)（盡可能減少填充床以外的死體積）及裝填技術(shù)。即使好的裝填技術(shù)，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的，靠近管壁的部位比較疏松，易產(chǎn)生溝流，流速較快，影響沖洗劑的流形，使譜帶加寬，這就是管壁效應(yīng)。這種管壁區(qū)大約是從管壁向內(nèi)算起30倍粒徑的厚度。在一般的液相色譜系統(tǒng)中，柱外效應(yīng)對柱效的影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于管壁效應(yīng)。

液相色譜柱流動性

1、在進(jìn)行樣品檢測前，至少使用20倍柱體積流動相使色譜柱充分平衡。流動相一定要使用色譜級別的溶劑。如使用水相的緩沖液應(yīng)當(dāng)天配制以保持新鮮避免細(xì)菌產(chǎn)生。

2、流動相使用前需用微孔濾膜過濾,消除流動相中顆粒對色譜系統(tǒng)和色譜柱的損壞。緩沖液與其他流動相混合后應(yīng)重新過濾避免溶解度變化造成產(chǎn)生新的沉淀。不應(yīng)使用純水作為流動相沖洗C18色譜柱，以免柱性能損壞（添加5%的沖洗色譜柱，同時可以達(dá)到對緩沖鹽清洗的作用。還可以使色譜柱更容易平衡）。

3、流動相需脫氣后使用，可避免因氣泡導(dǎo)致的泵和檢測器的工作不正常。如果測試時使用的流動相與色譜柱保存使用的流動相有較大區(qū)別，應(yīng)該使用過度分布的形式進(jìn)行平衡。避免由于流動相的突然變化造成柱壓增加過大或流動相緩沖鹽結(jié)晶造成對色譜柱和儀器系統(tǒng)的損壞。正相色譜柱比反相色譜柱需要更長的平衡時間。

液相色譜柱的構(gòu)造

液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套式接頭（密封圈）、篦板（過濾芯）、連接頭、螺釘（筒體）與柱填料等構(gòu)成。柱管：常用不銹鋼板做成，如果應(yīng)用時柱壓不高過70kg/cm2時，也可選用厚壁管夾層玻璃或石英加熱管，管內(nèi)腔規(guī)定有很高的光滑度。用以柱填料的填裝。空柱各部件均為金屬材質(zhì)，能承受一般的功效。但因為含氟化物的對其有一定的腐蝕，故應(yīng)用時要留意，柱及聯(lián)接管中不可以長期留存該類，以防止浸蝕。壓帽：即離子交換柱兩邊套合于柱管端表面的塑性變形圓柱體帽，中間有小圓孔，多見聚四氟乙烯做成，用以固定不動篦板。密封圈：坐落于連接頭螺旋式環(huán)內(nèi)腔的延展性環(huán)，多見聚四氟乙烯做成，用以離子交換柱兩邊壓帽與柱表面的密封性。