药xiao学实验-减肥功能的动物试验评价方法
1 测试项目
1.1 原理
这种方法是用高热量食物诱导动物肥胖,然后给试验样品(肥胖模型),或者同时给高热量食物给试验样品(肥胖预防模型),观察其变化动物体重和体脂含量。
1.2 肥胖模型法
SPF级雄性大鼠,体重180-220g,动物实验室,8-12只/组。在屏障系统下,给大鼠喂养维持饲料并观察5-7天。按体重随机分为两组,10只给予维持饲料作为空白对照组,可以做动物实验的公司,60只给予高热量模型饲料。每周记录喂食量、洒食量、剩食量,称体重1次。喂养2周后,将给予高热量饲料的60只大鼠按体重增加进行排序,剔除1/3体重增加较低的抗肥胖大鼠。选取40只肥胖敏感大鼠给予高热量饲料6周,空白对照组同时给予维持饲料。

敲低效果验证方法:
RT-PCR
检测mRNA,是否仍存在靶 mRNA?或是否敲低成功?
这种方法非常灵敏,但无法准确预测蛋白质水平。
蛋白质印迹实验
使用抗ti来检测样品中的靶蛋白表达以及多种相关蛋白质表达,从而观察靶蛋白敲除对其它蛋白质的影响。
免yi细胞化学法
可检测是否存在敲低蛋白。
其优势在于利用双重染色法,可同时检查敲除对其它蛋白质表达的影响以及其它蛋白质在细胞中的位置。

五、注意事项
1. 小宫设备和实验程序与大鼠类似,但迷宫规格应比大宫小,以免增加小鼠行为操作难度。
2. 本实验也可只用来测定工作记忆。方法中不同的是,在所有臂均放置食粒,而不是只选4个臂放置食粒。
3. 慢性应激对动物的迷宫操作可产生影响,且存在性别差异。经过慢性应激以后,雄性大鼠记忆力减弱,河北动物实验,表现为记忆错误频率增加;雄性大鼠的空间记忆反而增强,表现为错误频率减少。
4. 即使在限制进食条件下,也应让大鼠体重每周增加5g,以免动物因营养不良而患病。剔除身体状态不良的动物。
5. 迷宫周围的任何一件物品均可被动物用来作为空间定为的标志。去除或移动这些标志可能使动物操作困难并降低迷宫臂选择的准确性。
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