原位雜交技術(shù)在其他生物領(lǐng)域也有廣泛的應(yīng)用,例如:
植物學(xué)研究:在植物學(xué)研究中,熒光原位雜交,原位雜交技術(shù)可以用于檢測和定位特定基因的表達(dá),研究基因組結(jié)構(gòu)和進(jìn)化。此外,還可以應(yīng)用于植物染色體組型分析、基因組印記研究等方面。
微生物學(xué)研究:在微生物學(xué)領(lǐng)域,原位雜交技術(shù)可以用于研究細(xì)菌、病毒等微生物的基因表達(dá)和定位,以及它們在環(huán)境中的分布和相互作用。例如,通過標(biāo)記特異性探針,可以檢測腸道微生物群落中的特定,研究其在人體健康和疾病發(fā)生中的作用。
原位雜交技術(shù)(in situhybridization)是以標(biāo)記的核酸分子為探針,植物原位雜交,在組織細(xì)胞原位檢測特異核酸分子的技術(shù)。使含有特異序列、經(jīng)過標(biāo)記的核酸單鏈即探針,在適宜條件下與組織細(xì)胞中的互補(bǔ)核酸單鏈即靶核酸發(fā)生雜交,原位雜交,再以自顯影或細(xì)胞化學(xué)方法對標(biāo)記探針進(jìn)行探測,從而在細(xì)胞原位顯示特異的DNA或RNA分子。
可以檢測cRNA、miRNA、LnRNA、DNA。可以各種種屬的標(biāo)本,包括哺乳動物、爬行動物、菌、植物標(biāo)本。也可以檢測組織芯片。
FISH是原位雜交技術(shù)大家族中的一員,染色體熒光原位雜交,因其所用探針被熒光物質(zhì)標(biāo)記(間接或直接)而得名,該方法在80年代末 被發(fā)明,現(xiàn)已從實(shí)驗(yàn)室逐步進(jìn)入臨床診斷領(lǐng)域。基本原理是熒光標(biāo)記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火 溫度下復(fù)性;通過熒光顯微鏡觀察熒光信號可在不改變被分析對象(即維持其原位)的前提下對靶核酸進(jìn)行分析。DNA熒光標(biāo)記探針是其中常用的一類核酸探針。利用此探針可對組織、細(xì)胞或染色體中的DNA進(jìn)行染色體及基因水平 的分析。熒光標(biāo)記探針不對環(huán)境構(gòu)成污染,靈敏度能得到保障,可進(jìn)行多色觀察分析,因而可同時使用多個探針,縮 短因單個探針分開使用導(dǎo)致的周期過程和技術(shù)障礙。
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