將32 P標(biāo)記的雙鏈DNA探針于100℃加熱5分鐘，迅速置于冰浴中。單鏈探針不必變性。將探針加到雜交袋中雜交過(guò)夜。雜交期間，盛濾膜的容器應(yīng)蓋嚴(yán)，以防液體蒸發(fā)。
雜交結(jié)束后，去除雜交液，立即于室溫把濾膜放入大體積（300-500ml）的2×SSC和0.1% SDS溶液中，輕輕振搖5分鐘，并將濾膜至少翻轉(zhuǎn)一次。重復(fù)洗 一次，同時(shí)應(yīng)避免膜干涸。
68℃用300-500ml 1×SSC和0.1% SDS溶液洗膜兩次，每次1-1.5小時(shí)。此時(shí)已可進(jìn)行自顯影。如背景很高或?qū)嶒?yàn)要求嚴(yán)格的洗膜條件，可用300-500ml 0.2×SSC和0.1% SDS的溶液于68℃將濾膜浸泡60分鐘。



 
 
菌落的裂解及DNA結(jié)合于纖維素濾膜
（1） 在一張保鮮膜上制作一個(gè)裝有0.5mol/L NaOH的小洼（0.75ml），動(dòng)物組織原位雜交，使菌落面朝上，將濾膜放到小洼上，展平保鮮膜，原位雜交，使濾膜均勻濕潤(rùn)，讓濾膜留于原處2-3分鐘。
（2） 用干紙巾從濾膜的下方吸干濾膜，用一張新的保鮮膜和新配制的0.5mol/L NaOH重復(fù)步驟（1）。
（3） 吸干濾膜，將濾膜轉(zhuǎn)移到新的帶有1mol/L Tris·Cl(pH7.4）的保鮮膜洼上。5分鐘后吸干濾膜，再重復(fù)一次該步驟。
（4） 吸干濾膜，把它轉(zhuǎn)移到有1.5mol/L NaCl、0.5mol/L Tris·Cl (pH7.4）的保鮮膜小洼上5分鐘后吸干濾膜，轉(zhuǎn)移到一張干的濾紙上，置于室溫20-30分鐘，使濾膜干燥。
（5） 將濾膜夾在兩張干的濾紙之間，植物染色體原位雜交，在真空烤箱中于80℃干烤2小時(shí)，ISH，固定DNA。
（6） 將固定在膜上的DNA與32 P標(biāo)記的RNA進(jìn)行雜交。



 

熒光原位雜交（Fluorescence In Situ Hybridization，F(xiàn)ISH）是在性原位雜交技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種非性分子生物學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)結(jié)合的新技術(shù)，是以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記而形成的一種新的原位雜交方法。
FISH技術(shù)具有許多優(yōu)點(diǎn)，如非性、高特異性、高靈敏度、簡(jiǎn)便、可多重染色等。這些特點(diǎn)使得FISH技術(shù)在細(xì)胞生物學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用，例如用于研究基因表達(dá)、基因組變異和染色體異常等。




 
 貝科新肽(圖)-動(dòng)物組織原位雜交-原位雜交由武漢貝科新肽科技有限公司提供。武漢貝科新肽科技有限公司位于湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號(hào)紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號(hào)。在市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)的浪潮中拼博和發(fā)展，目前貝科新肽在化學(xué)試劑中享有良好的聲譽(yù)。貝科新肽取得全網(wǎng)商盟認(rèn)證，標(biāo)志著我們的服務(wù)和管理水平達(dá)到了一個(gè)新的高度。貝科新肽全體員工愿與各界有識(shí)之士共同發(fā)展，共創(chuàng)美好未來(lái)。 
產(chǎn)品：貝科新肽
供貨總量：不限
產(chǎn)品價(jià)格：議定
包裝規(guī)格：不限
物流說(shuō)明：貨運(yùn)及物流
交貨說(shuō)明：按訂單