RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學或RNA原位雜交。該技術是指運用cRNA或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內RNA表達的一種原位雜交技術。其基本原理是:在細胞或組織結構保持不變的條件下,用標記的已知的RNA核苷酸片段,GISH,按核酸雜交中堿基配對原則,與待測細胞或組織中相應的基因片段相結合(雜交),所形成的雜交體(Hybrids)經顯色反應后在光學顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內相應的mRNA、rRNA和tRNA分子。RNA原位雜交技術經不斷改進,其應用的領域已遠超出DNA原位雜交技術。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析,已成為有效的分子病理學技術,同時在分析低豐度和罕見的mRNA表達方面已展示了分子生物學的一重要方向。
熒光原位雜交(FISH)技術具有以下優點:
可多重染色:利用不同的熒光染料標記不同的探針,可以實現多重熒光原位雜交,從而同時檢測多個序列,提高實驗效率了。
高度性和性:FISH技術不僅可以用于研究已知基因或序列的染色體定位,還可以用于未基因或遺傳標記及染色體畸變的研究,在基因定性、定量、整合、表達等方面的研究中頗具優勢。
原位雜交:
原位雜交是指用特定探針定位、檢測DNA、RNA的一種有效的實驗方法,通過把特點序列客隆到特殊載體上,通過轉錄酶反轉一條天然的RNA探針,將探針和切片樣品進行雜交,通過一系列顯色方法,來確定RNA或者DNA表達區域;本中心原位雜交探針采用的是第高辛和生物素標記,靈敏度和同位素相當。 我們采用roche標記及顯色試劑盒,GISH/ISH/FISH按照探針進行收費,每個試劑盒每條探針可以雜交60-80張玻片,收費為1萬5千元,GISH雜交因需要加抗淬滅劑每條探針收費為1萬9千元。量大優惠!
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