信使RNA（mRNA）早先發現于1960年，在蛋白質合成過程中負責傳遞遺傳信息、直接指導蛋白質合成，具有以下特點。?1.含量低，占細胞總RNA的1%~5%。2.種類多，可達105種。不同基因表達不同的mRNA。?3.壽命短，不同mRNA指導合成不同的蛋白質，完成使命后即被降解。細菌mRNA的平均半衰期約為1.5分鐘。脊椎動物mRNA的半衰期差異極大，平均約為3小時。4.長度差異大哺乳動物mRNA長度為5×102~1×105nt原核生物與真核生物的mRNA雖然在結構上有差異，但功能一樣，都是指導蛋白質合成的模板。 植物ＤＮＡ的ＳＤＳ提取法：1 取2-3ｇ新鮮葉片，在液氮中研磨成粉狀(防止溶化)后轉入15ｍｌ離心管中。2 加入5ｍｌ于65℃預熱的提取緩沖液，65℃水浴保溫30ｍｉｎ(搖動數次)，使提取液與樣品充分混合。3 加入2ｍｌ5ｍｏｌ/ＬＫＡｃ，劇烈振蕩，冰浴保溫20ｍｉｎ以上。4 2700×ｇ離心20ｍｉｎ，將上清液倒入新的15ｍｌ離心管中，(若提取ＤＮＡ用于Ｓｏｕｔｈｅｒｎ等實驗，一般在轉移上清時加濾膜，防止樣品殘渣混入，可保證ＤＮＡ純度)。5 加入4ｍｌ氯1仿/異戊1醇(24∶1)，搖勻，平衡，2700×ｇ離心15ｍｉｎ。6 在另一新的15ｍｌ離心管中加入5ｍｌ預冷的異丙1醇，PCR產物回收，將上清液用移液槍轉入此管，在-20℃冷卻30ｍｉｎ以上。7 2700×ｇ離心10ｍｉｎ，棄去上清液，用4ｍｌ70%乙醇洗滌，室溫保持10ｍｉｎ。2700×ｇ離心3ｍｉｎ，倒去上清液。8 重復步驟7，用4ｍｌ70%乙醇洗滌，室溫保持10ｍｉｎ。2700×ｇ離心3ｍｉｎ，倒去上清液。超凈工作臺內吹干(3ｈ左右)。9 加1ｍｌＴＥ緩沖液中溶解，加10μｌＲＮａｓｅ(10ｍｇ/ｍｌ)，在37℃恒溫箱中溫育20ｍｉｎ。10 再加100μｌ3ｍｏｌ/ＬＮａＡｃ和2ｍｌ無水乙醇，2700×ｇ離心3ｍｉｎ，倒去上清液。超凈工作臺內吹干(3ｈ左右)。11 將ＤＮＡ沉淀溶于150μｌＴＥ中，置于超凈工作臺內(3ｈ左右)。將ＴＥ溶液轉入已滅菌的1 5ｍｌｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中，-20℃保存備用。如何確認RNA的質量實時熒光定量PCR技術是通過測定RNA的轉錄水平來評估基因的活力。RNA樣本提取的質量直接影響基因表達分析。影響RNA的因素有以下三種：RNA濃度、RNA純度和RNA完整性。檢測RNA濃度、純度和完整性的方式主要有以下幾種：紫外分光光度計法：測量260nm吸收值計算RNA濃度，測量260nm/280nm吸收值的比值，用于評估RNA純度。需要注意的是：在檢測核酸物質時應該在固定的PH溶液中進行。260nm/280nm的比值范圍在 1.9~2.1 之間。＜1.9，說明有蛋白質殘留；＞2.1，說明RNA可能發生降解。瓊脂糖凝膠電泳：完整的RNA通常有三條帶，zui亮的是28S條帶，其次是18S條帶，zui淡的是5S條帶（部分試劑盒提取時會過濾掉5S條帶）。通過瓊脂糖凝膠電泳可以檢測28S和18S的比值。該方法主要用于檢測RNA的純度和完整性。如果28S和18S條帶明亮、清晰、條帶銳利，28S的亮度在18S條帶的兩倍以上，我們認為RNA的質量zui好。若RNA條帶出現彌散，原因可能：RNA被核酸酶降解、電壓或電流過大、上樣量過高或過低等。  PCR產物回收-武漢友名生物由武漢友名生物技術有限公司提供。武漢友名生物技術有限公司是從事“商務服務”的企業，公司秉承“誠信經營，用心服務”的理念，為您提供更好的產品和服務。歡迎來電咨詢！聯系人：董先生。 產品：友名生物供貨總量：不限產品價格：議定包裝規格：不限物流說明：貨運及物流交貨說明：按訂單