雜交流程雜交液的成分主要影響了核酸雜交的復(fù)性動力學(xué)和熱穩(wěn)定性。雜交液的基礎(chǔ)成分為：Denhardt’s溶液（Ficoll，BSA，PVP），異源核酸（如鯡精3子DNA/tRNA/競爭DNA），磷酸鈉，EDTA，SDS，鹽離子，原位雜交儀制造廠家，甲酰胺和硫酸葡聚糖，以及雜交探針。不同的應(yīng)用中進行雜交溫度、pH、鹽離子、甲酰胺、探針濃度等條件的優(yōu)化。常用的pH范圍為6.5~7.5，較高的pH值有助于提高雜交的嚴(yán)謹(jǐn)性。 雜交技術(shù)zui重要的因素之一是選擇zui適的雜交反應(yīng)溫度。若反應(yīng)溫度Tm 10～15℃，堿基順序高度同源的互補鏈可形成穩(wěn)定的雙鏈，錯配對減少。若反應(yīng)溫度再低（Tm-30℃），雖然互補鏈之間也可形成穩(wěn)定的雙鏈，但互補堿基配對減少，錯配對增多、氫鍵結(jié)合的更弱。如兩個同源性在50%左右或更低些的DNA，調(diào)整雜交溫度可使它們之間的雜交率變化10倍，因此在實驗前必須首先確定雜交溫度。通常有三種溫度可供試驗，即zui適復(fù)性溫度、苛刻復(fù)性溫度及非苛刻復(fù)性溫度。溫度的選擇及溫度對雜交的影響見表18-3。zui適復(fù)性溫度（Optimunm renaturation temperature， TOR）：Tor =Tm –25℃苛刻復(fù)性溫度：Ts = Tm – (10或15℃)非苛刻復(fù)性溫度：Tns =Tm – (30或35℃)原位雜交(In Situ Hybridization)也叫原位雜交組化(in situ hybridization histochemistry， ISHH)，是一種固相分子雜交的方法，bai它是用標(biāo)記的DNA或RNA為探針，在原位檢測組織或細(xì)胞內(nèi)特定核酸序列的方法。探針的種類按所帶標(biāo)記物可分為同位素標(biāo)記探針和非同位素標(biāo)記探針兩大類。常用的同位素標(biāo)記物有3H、35S、125I和32P，非同位素標(biāo)記物中目前很常用的有生物素、地高6辛和熒光素三種。探針的種類按核酸性質(zhì)不同又可分為DNA探針、cDNA探針、RNA探針和合成寡核苷酸探針。原位雜交術(shù)可在原位檢測細(xì)胞合成某種多肽或蛋白質(zhì)的基因表達，有很高的敏感性和特異性，已成為細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)研究的重要手段。  原位雜交儀制造廠家-思特進(推薦商家)由武漢思特進科技發(fā)展有限公司提供。武漢思特進科技發(fā)展有限公司為客戶提供“動植物，細(xì)菌，細(xì)胞生物實驗”等業(yè)務(wù)，公司擁有“思特進”等，專注于辦公、文教項目合作等行業(yè)。，在湖北省武漢市江夏區(qū)高新四路40號葛洲壩的名聲不錯。歡迎來電垂詢，聯(lián)系人：夏經(jīng)理。 產(chǎn)品：思特進供貨總量：不限產(chǎn)品價格：議定包裝規(guī)格：不限物流說明：貨運及物流交貨說明：按訂單