藥xiao學實驗-減肥功能的動物試驗評價方法
1 測試項目
1.1 原理
這種方法是用高熱量食物誘導動物肥胖，然后給試驗樣品（肥胖模型），或者同時給高熱量食物給試驗樣品（肥胖預防模型），觀察其變化動物體重和體脂含量。
1.2 肥胖模型法
SPF級雄性大鼠，體重180-220g，動物實驗室，8-12只/組。在屏障系統下，給大鼠喂養維持飼料并觀察5-7天。按體重隨機分為兩組，10只給予維持飼料作為空白對照組，可以做動物實驗的公司，60只給予高熱量模型飼料。每周記錄喂食量、灑食量、剩食量，稱體重1次。喂養2周后，將給予高熱量飼料的60只大鼠按體重增加進行排序，剔除1/3體重增加較低的抗肥胖大鼠。選取40只肥胖敏感大鼠給予高熱量飼料6周，空白對照組同時給予維持飼料。




 
敲低效果驗證方法：
RT-PCR
檢測mRNA，是否仍存在靶 mRNA？或是否敲低成功？
這種方法非常靈敏，但無法準確預測蛋白質水平。

蛋白質印跡實驗
使用抗ti來檢測樣品中的靶蛋白表達以及多種相關蛋白質表達，從而觀察靶蛋白敲除對其它蛋白質的影響。
免yi細胞化學法
可檢測是否存在敲低蛋白。
其優勢在于利用雙重染色法，可同時檢查敲除對其它蛋白質表達的影響以及其它蛋白質在細胞中的位置。



五、注意事項
1． 小宮設備和實驗程序與大鼠類似，但迷宮規格應比大宮小，以免增加小鼠行為操作難度。
2． 本實驗也可只用來測定工作記憶。方法中不同的是，在所有臂均放置食粒，而不是只選4個臂放置食粒。
3． 慢性應激對動物的迷宮操作可產生影響，且存在性別差異。經過慢性應激以后，雄性大鼠記憶力減弱，河北動物實驗，表現為記憶錯誤頻率增加；雄性大鼠的空間記憶反而增強，表現為錯誤頻率減少。
4． 即使在限制進食條件下，也應讓大鼠體重每周增加5g，以免動物因營養不良而患病。剔除身體狀態不良的動物。
5． 迷宮周圍的任何一件物品均可被動物用來作為空間定為的標志。去除或移動這些標志可能使動物操作困難并降低迷宮臂選擇的準確性。




 
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